随着质谱的应用越来越广泛，许多国标更新后都会开发出质谱法。不知道读者是否有这样的经历：明明是按国标来配制溶液，仪器也是一样的，甚至更先进、型号更新，但就是无法重现国标的结果，导致扩项工作一直无法顺利开展。

今天作者就“无法重现”这个问题讲一下个人的看法。

要搞明白这个问题，我们需要排除先入为主的想法，即：先不要认为是人家出错。有的人也许会觉得：溶液、标准品、仪器都一样的，但是质谱的离子对一个都没有，甚至连母离子都是找不到，总不可能试剂仪器换了一个品牌就不行吧？这个想法确实是合理的，虽然有些实验对试剂的要求可能会比较高，但大多数情况下，国标也不可能在这么高的要求下完成的。

我们或许可以换一个角度来看，是否我们的实验环境需要找的目标离子与国标中的会不一样呢？

举例，我们都知道质谱中，是靠质荷比来寻找母离子的，而不是分子质量。因为大多数情况下，无论化合物是通过加合，还是丢失基团的形式形成母离子，由于电荷的斥力作用，会导致母离子内部很难存在两个或以上的相同电荷。

因此大部分的母离子带电荷数一般都是1，久而久之，很多人就会认为质荷比就是母离子质量数。下图是柠檬黄色素的结构式，从该结构式可以看出，由于柠檬黄是一种盐，因此其分子在质谱中会很容易丢失不同个数的Na⁺，形成相应的带负电的母离子。

通过计算可以知道，柠檬黄的分子质量是534。

如果是丢失一个Na⁺，那么此时的质荷比就是511，这也是母离子的质量数；但如果丢失两个Na⁺，那么这时的带电荷数就是2了，即质荷比为母离子的质量数除以2；而且可能还会有丢失3个钠的情况，这时候就需要将母离子的质量数除以3。

为什么会出现这个差异呢？其实主要是由于体系中pH的影响所导致的。

由于-SO₃Na是离子键，在溶液中，柠檬黄会失去所有的Na⁺。但随着pH的不同，柠檬黄在丢失Na⁺之后，-SO₃-又会重新与H⁺结合，导致该位点呈现不带电的状态。因此pH对这类多Na盐化合物的质荷比的影响是巨大的。所以我们首先要排查，目标物的质荷比是否错了。

另外，在找母离子的过程中，如果遇到质荷比正确，但响应仍然低的情况，我们还需要留意，目标物所结合的离子是什么，该离子是否在系统中稳定存在？

例如，一些化合物的母离子是与Na⁺结合的，可能在一些经常用于检测食品的仪器中，该化合物会呈现很高响应的[M+ Na]⁺峰。这是因为食品中含Na元素比较多，因此残留在仪器中。而对于一些经常用于分析药物的仪器，可能Na元素的残留就没那么多了，因此响应就低很多，这会导致无法重现其他方法的结果。

当我们遇到无法重现国标方法的时候，先不要急，更不要放弃。我们可以先将实验的关键点罗列出来，逐条分析、校正，一步一步排查，认真思考实验环境是否适合化合物的测定，总能找到解决问题的办法的。